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按這個步驟操作牛ELISA檢測試劑盒，簡單易懂

發(fā)布時間：2021-12-23   點擊次數(shù)：1466次
　　牛ELISA檢測試劑盒主要用于測定血清、血漿、組織和相關(guān)液體樣本中的含量或者活性，剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響，您可放心使用。
 
　　實驗原理：
　　牛ELISA檢測試劑盒采用夾心酶免法，采用了兩種高特異性抗體，TMB作為著色劑，最終溶液所顯示的顏色強度與樣品中指標(biāo)的量成正比。
 
　　特別注意：
　　1、樣品采集后應(yīng)立即檢測，如需貯存的，則應(yīng)放置在冰凍條件下，避免反復(fù)凍融，檢測前應(yīng)在低溫下將其溶解并*混合；
　　2、如有需要，樣品可用EIA緩沖液稀釋；
　　3、建議試驗樣品和標(biāo)準(zhǔn)品做雙份檢測；
　　4、試驗樣品應(yīng)在中性PH范圍內(nèi)，有機溶劑的污染會影響試驗；
　　5、只能使用試劑盒內(nèi)提供的洗滌液洗板，洗板不充足可能會導(dǎo)致試驗失?。?/div>
　　6、*倒去洗滌液，吸水紙上拍干，不能用吸水紙擦拭微孔；
　　7、底物液應(yīng)避光保存，因其對光敏感，且要避免接觸金屬；
　　8、加入終止液后30min內(nèi)讀數(shù)。
 
　　牛ELISA檢測試劑盒操作步驟：
　　1、從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃；
　　2、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；
　　3、樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加；
　　4、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min；
　　5、棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次；
　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min；
　　7、每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。
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