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葡萄糖-6-磷酸酶測試盒操作步驟

發(fā)布時間:2021-04-21   點擊次數(shù):1121次

葡萄糖-6-磷酸酶測試盒操作步驟

產(chǎn)品說明: 葡萄糖-6-磷酸酶((glucose 6 phosphatase,G6Pase,EC 3.1.3.9)是一種水解磷酸化合物的磷酸酶,廣泛存在 于動物、植物、微生物和細(xì)胞中,是糖異生過程水解葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖的限制酶,在保證血糖的動態(tài)平衡方面起著重要的作用。

G6P催化葡萄糖-6-磷酸生成葡萄糖和無機磷,利用鉬藍法測定無機磷含量的增加,即可反映G6P活性。 

注意:實驗之前建議選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者 增加樣本量進行檢測。 

需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、低溫臺式離心機、水浴鍋、1mL玻璃比色皿、可調(diào)式移液qiang、研缽/勻漿器、EP管、冰和蒸 餾水。

 

樣本處理
1、細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量(104 個):提取 液體積(mL)為 500~1000:1 的比例(建議 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液),超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴, 功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 提取液), 進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

3、血清(漿)樣本:直接檢測。 

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