羊elisa檢測(cè)試劑盒測(cè)定在臨床檢驗(yàn)中的應(yīng)用由于各種抗原成份，包括小分子的半抗原，均可用以制備特異性的抗血清或單克隆抗體，利用此抗體作為試劑就可檢測(cè)標(biāo)本中相應(yīng)的抗原，因此免疫測(cè)定的應(yīng)用范圍極廣，在臨床檢驗(yàn)中可用于測(cè)定：
1、體液中的各種蛋白質(zhì)，包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等。
2、激素，包括小分子量的甾體激素等。
3、抗生素和藥物。
4、病原體抗原，HBsAg、HBeAg等。
5、另外，也可利用純化的抗原檢測(cè)標(biāo)本中的抗體，例如抗-HBs等。
1、*試劑：性、靈敏性、特異性。
2、規(guī)范包被操作：吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高。
3、先進(jìn)的優(yōu)化方案：回收利用率高、可靠性強(qiáng)。
4、適用范圍：適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5、可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等。
6、節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。
羊elisa檢測(cè)試劑盒的操作流程如下：
1、待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
2、酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
3、洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍，之后將洗滌液注滿(mǎn)板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
4、陰性對(duì)照孔每孔加入PBS50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
5、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
6、洗板，同（4）。
7、每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液100μl。
8、酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
9、洗板，同（4）。
10、每孔加TMB顯色液100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
11、每孔加100μl2mol/LH2SO4終止反應(yīng)。
12、分別測(cè)450nm吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
13、數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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